摘要
目的
探讨血清趋化因子CC亚家族配体20(CCL20)、脂肪酸合酶(FAS)、固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)联合检测在结直肠癌临床诊断及预后评估中的应用价值。
方法
选取2017年1月至2020年5月106例结直肠癌患者为研究对象,50例健康体检者为对照,均检测血清CCL20、FAS、SREBP-1c,绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估CCL20、FAS、SREBP-1c的诊断价值,并随访预后结局,进行生存分析。
结果
结直肠癌组的血清CCL20、FAS、SREBP-1c水平均高于健康对照组(P<0.05)。血清CCL20、FAS、SREBP-1c诊断结直肠癌的灵敏度分别为80.00%、78.00%、76.00%,特异度分别为68.60%、81.40%、75.50%。血清CCL20、FAS、SREBP-1c水平与分化程度、临床分期有关联(P<0.05),与性别、年龄、肿瘤部位、大体分型、组织学分型无关联(P>0.05)。CCL20、FAS、SREBP-1c高水平组3年无进展生存率分别为41.67%、42.86%、41.11%,低于CCL20、FAS、SREBP-1c低水平组的68.18%、73.33%、81.25%(P<0.05)。CCL20、FAS、SREBP-1c高水平组无进展生存时间为33个月,短于CCL20、FAS、SREBP-1c低水平组的38、48、44个月(P<0.05)。
结论
血清CCL20、FAS、SREBP-1c可能与结直肠癌的发生发展有一定关联,可作为结直肠癌的辅助诊断筛查和预后随访指标,血清CCL20、FAS、SREBP-1c高水平可能预示着肿瘤进展和预后不良。
结直肠癌多发于40~70岁,病灶多见于直肠、乙状结肠,组织学分型以腺癌居
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2017年1月至2020年5月安阳市人民医院收治的106例结直肠癌患者为研究对象。男63例,女43例;年龄40~74岁,平均(55.48±6.21)岁;肿瘤部位:右半结肠29例,左半结肠37例,直肠40例;大体分型:肿块型19例,浸润型21例,溃疡型66例;组织学分型:腺癌87例,粘液癌19例;分化程度:低分化30例,中分化16例,高分化60例;TNM分期:Ⅰ期10例,Ⅱ期33例,Ⅲ期45例,Ⅳ期18例。纳入标准:①符合结直肠癌诊断标
1.2 方法
所有研究对象均检测血清CCL20、FAS、SREBP-1c(结直肠癌患者于手术或化疗前检测)。空腹采集肘静脉血,3 000 r/min离心10 min,分离血清统一待检。使用Multiskan MK3多功能酶标仪(Beckman公司),采用酶联免疫吸附法检测血清CCL20、FAS、SREBP-1c,试剂盒购自赛默飞世尔科技公司。具体步骤:①设标准孔10孔,分别加入稀释成不同浓度的标准品(按说明书操作);设空白孔不加试剂;②设样本孔,加待测血清样本10 μL和稀释液40 μL;③37 ℃温育5 min;④PBS缓冲液重复洗涤5次;⑤除空白孔外,每孔加入CCL20、FAS、SREBP-1c试剂盒中相应的生物素化抗体试剂50 μL;⑥再次37 ℃温育5 min;⑦再次PBS缓冲液重复洗涤5次;⑧每孔加入CCL20、FAS、SREBP-1c试剂盒中相应的显色剂50 μL,37 ℃避光显色15 min;⑨每孔加入CCL20、FAS、SREBP-1c试剂盒中相应的终止液50 μL;⑩酶标仪测定不同浓度标准孔在450 nm波长的吸光度值,使用Excel软件,样本浓度为X轴,吸光度值为Y轴,绘制标准曲线,在标准曲线上查找对应的待测血清样本的浓度值。
1.3 治疗与预后随访
所有患者接受标准化治疗:①结直肠癌T1N0M0期:进行手术切除+区域淋巴结清扫;②结肠癌T2-4,N0-2,M0期:首选手术切除+区域淋巴结清扫,对于T4期可先行术前化疗再手术;③直肠癌T2-4,N0-2,M0期:中上段直肠癌行低位前切除术,低位直肠癌行会阴联合切除术,中下段直肠癌全系膜切除术。对于T3-4或N1-2期可术前化疗再手术。④结直肠癌M1期无法手术,给予近端造口术姑息治疗。⑤Ⅱ~Ⅲ期辅助化疗方案选用CapeOx,FOLFOX方案或单药卡培他滨,5-FU/LV方案。⑥晚期转移患者化疗方案选用FOLFOX/FOLFIRI±西妥昔单抗(推荐用于KRAS、NRAS、BRAF基因野生型患者)或CapeOx/FOLFOX/FOLFIRI/±贝伐珠单抗。化疗4~6个月后病情稳定但仍无手术机会,改为毒性较低的5-FU/LV或卡培他滨单药或联合靶向治疗。
定期随访,监测血便常规、肿瘤标志物CEA、CA19-9以及直肠指检、肠镜、CT、MRI等。第1~2年每3个月随访1次,后续每半年随访1次,本研究随访3~4年,截止至2023年5月。记录患者的无进展生存期,计算3年无进展生存率。
1.4 统计学方法
使用SPSS 22.0软件。满足正态分布的计量资料以均数±标准差()表示,采用独立样本检验。计数资料以百分率(%)表示,采用检验。绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估诊断价值,计算灵敏度、特异度、最佳截断阈值。采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,生存分析进行Log rank检验。P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组血清CCL20、FAS、SREBP-1c水平比较
结直肠癌组患者的血清CCL20、FAS、SREBP-1c水平均高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05),见
组别 | CCL20/(pg/mL) | FAS/(ng/mL) | SREBP-1c/(ng/mL) | |
---|---|---|---|---|
结直肠癌组 | 106 | 44.28±10.14 | 5.33±1.06 | 21.36±4.99 |
健康对照组 | 50 | 29.67±8.52 | 2.92±0.80 | 12.34±2.71 |
t | 8.821 | 14.265 | 11.963 | |
P | <0.001 | <0.001 | <0.001 |
2.2 血清CCL20、FAS、SREBP-1c诊断结直肠癌的ROC曲线分析
血清CCL20、FAS、SREBP-1c诊断结直肠癌的灵敏度分别为80.00%、78.00%、76.00%,特异度分别为68.60%、81.40%、75.50%,ROC曲线下面积分别为0.792、0.849、0.778。见
指标 | 阈值 | AUC | 95%CI | 灵敏度/% | 特异度/% | 约登指数 |
---|---|---|---|---|---|---|
CCL20 | 36.50 | 0.792 | 0.715~0.869 | 80.00 | 68.60 | 0.486 |
FAS | 4.20 | 0.849 | 0.782~0.917 | 78.00 | 81.40 | 0.594 |
SREBP-1c | 16.00 | 0.778 | 0.696~0.859 | 76.00 | 75.50 | 0.515 |

图1 血清CCL20、FAS、SREBP-1c诊断结直肠癌的ROC曲线
2.3 血清CCL20、FAS、SREBP-1c与结直肠癌临床特征的关联性分析
根据ROC曲线分析的阈值将106例结肠癌患者分为CCL20高水平组84例和CCL20低水平组22例,FAS高水平组91例和FAS低水平组15例,SREBP-1c高水平组90例和SREBP-1c低水平组16例。血清CCL20、FAS、SREBP-1c水平与分化程度、临床分期有关联,差异有统计学意义(P<0.05),与性别、年龄、肿瘤部位、大体分型、组织学分型无关联,差异无统计学意义(P>0.05)。见
一般资料 | CCL20高水平(=84) | CCL20低水平(=22) | P | ||
---|---|---|---|---|---|
性别 | |||||
男 | 63 | 48(57.14) | 15(68.18) | 0.881 | 0.348 |
女 | 43 | 36(42.86) | 7(32.82) | ||
年龄 | |||||
<60岁 | 59 | 45(53.57) | 14(63.64) | 0.716 | 0.398 |
≥60岁 | 47 | 39(46.43) | 8(36.36) | ||
肿瘤部位 | |||||
右半结肠 | 29 | 20(23.80) | 9(40.91) | 3.057 | 0.217 |
左半结肠 | 37 | 32(38.10) | 5(22.73) | ||
直肠 | 40 | 32(38.10) | 8(36.36) | ||
大体分型 | |||||
肿块型 | 19 | 16(19.05) | 3(13.64) | 1.307 | 0.520 |
浸润型 | 21 | 18(21.43) | 3(13.64) | ||
溃疡型 | 66 | 50(59.52) | 16(72.72) | ||
组织学分型 | |||||
腺癌 | 87 | 70(83.33) | 17(77.27) | 0.435 | 0.509 |
粘液癌 | 19 | 14(16.67) | 5(22.73) | ||
分化程度 | |||||
低分化 | 30 | 28(33.33) | 2(9.09) | 5.049 | 0.025 |
中高分化 | 76 | 56(66.67) | 20(90.91) | ||
临床分期 | |||||
Ⅰ~Ⅱ期 | 43 | 26(30.95) | 17(77.27) | 15.515 | <0.001 |
Ⅲ~Ⅳ期 | 63 | 58(69.05) | 5(22.73) |
一般资料 | FAS高水平(=91) | FAS低水平(=15) | P | ||
---|---|---|---|---|---|
性别 | |||||
男 | 63 | 54(59.34) | 9(60.00) | 0.002 | 0.692 |
女 | 43 | 37(40.66) | 6(40.00) | ||
年龄 | |||||
<60岁 | 59 | 50(54.95) | 9(60.00) | 0.133 | 0.715 |
≥60岁 | 47 | 41(45.05) | 6(40.00) | ||
肿瘤部位 | |||||
右半结肠 | 29 | 23(25.28) | 6(40.00) | 3.719 | 0.156 |
左半结肠 | 37 | 35(38.46) | 2(13.33) | ||
直肠 | 40 | 33(36.26) | 7(46.67) | ||
大体分型 | |||||
肿块型 | 19 | 16(17.58) | 3(20.00) | 2.337 | 0.311 |
浸润型 | 21 | 16(17.58) | 5(33.33) | ||
溃疡型 | 66 | 59(64.84) | 7(46.67) | ||
组织学分型 | |||||
腺癌 | 87 | 74(81.32) | 13(86.67) | 0.250 | 0.617 |
粘液癌 | 19 | 17(18.68) | 2(13.33) | ||
分化程度 | |||||
低分化 | 30 | 29(31.87) | 1(6.67) | 4.030 | 0.045 |
中高分化 | 76 | 62(68.13) | 14(93.33) | ||
临床分期 | |||||
Ⅰ~Ⅱ期 | 43 | 33(36.26) | 10(66.67) | 4.937 | 0.026 |
Ⅲ~Ⅳ期 | 63 | 58(63.74) | 5(33.33) |
一般资料 | SREBP-1c高水平(=90) | SREBP-1c低水平(=16) | P | ||
---|---|---|---|---|---|
性别 | |||||
男 | 63 | 55(61.11) | 8(50.00) | 0.696 | 0.404 |
女 | 43 | 35(38.89) | 8(50.00) | ||
年龄 | |||||
<60岁 | 59 | 48(53.33) | 11(68.75) | 1.308 | 0.253 |
≥60岁 | 47 | 42(46.67) | 5(31.25) | ||
肿瘤部位 | |||||
右半结肠 | 29 | 25(27.78) | 4(25.00) | 1.319 | 0.517 |
左半结肠 | 37 | 33(36.67) | 4(25.00) | ||
直肠 | 40 | 32(35.55) | 8(50.00) | ||
大体分型 | |||||
肿块型 | 19 | 14(15.56) | 5(31.25) | 3.160 | 0.206 |
浸润型 | 21 | 17(18.89) | 4(25.00) | ||
溃疡型 | 66 | 59(65.56) | 7(43.75) | ||
组织学分型 | |||||
腺癌 | 87 | 75(83.33) | 12(75.00) | 0.641 | 0.423 |
粘液癌 | 19 | 15(16.67) | 4(25.00) | ||
分化程度 | |||||
低分化 | 30 | 30(33.33) | 0(0.00) | 7.439 | 0.006 |
中高分化 | 76 | 60(66.67) | 16(100.00) | ||
临床分期 | |||||
Ⅰ~Ⅱ期 | 43 | 30(33.33) | 13(81.25) | 12.937 | <0.001 |
Ⅲ~Ⅳ期 | 63 | 60(66.67) | 3(18.75) |
2.4 生存分析
106例患者中位无进展生存时间为33.9(7.5~48)个月,3年无进展生存率为47.17%(50/106)。
CCL20高水平组患者中位无进展生存时间为33(7.5~48)个月,3年无进展生存率为41.67%;CCL20低水平组患者中位无进展生存时间为38(15.8~48)个月,3年生存率为68.18%;CCL20高水平组患者的3年无进展生存率低于CCL20低水平组(P<0.05),两组患者生存曲线比较差异有统计学意义(Log rank=5.488, P=0.019),见

图2 血清CCL20高、低水平组无进展生存曲线
组别 | 3年无进展生存率 | P | ||
---|---|---|---|---|
CCL20 | ||||
CCL20高水平 | 84 | 35(41.67) | 4.919 | 0.027 |
CCL20低水平 | 22 | 15(68.18) | ||
FAS | ||||
FAS高水平 | 91 | 39(42.86) | 4.800 | 0.028 |
FAS低水平 | 15 | 11(73.33) | ||
SREBP-1c | ||||
SREBP-1c高水平 | 90 | 37(41.11) | 8.783 | 0.003 |
SREBP-1c低水平 | 16 | 13(81.25) |
FAS高水平组患者中位无进展生存时间为33(7.5~48)个月,3年无进展生存率为42.86%;FAS低水平组患者中位无进展生存时间为48(12~48)个月,3年无进展生存率为73.33%;FAS高水平组患者的3年无进展生存率低于FAS低水平组(P<0.05),两组患者生存曲线比较差异有统计学意义(Log rank=5.690,P=0.017),见

图3 血清FAS高、低水平组无进展生存曲线
SREBP-1c高水平组患者中位无进展生存时间为33(7.5~48)个月,3年无进展生存率为41.11%;SREBP-1c低水平组患者中位无进展生存时间为44(18~48)个月,3年无进展生存率为81.25%;SREBP-1c高水平组患者的3年无进展生存率低于SREBP-1c低水平组(P<0.05),两组患者生存曲线比较差异有统计学意义(Log rank=6.498,P=0.011),见

图4 血清SREBP-1c高、低水平组无进展生存曲线
3 讨论
本研究探讨血清CCL20、FAS、SREBP-1c与结直肠癌的关联,发现结直肠癌患者的血清CCL20、FAS、SREBP-1c水平均高于健康对照组,这说明了结直肠癌患者的血清CCL20、FAS、SREBP-1c普遍呈高水平。这与FARA
CCL20是趋化因子CC亚家族的一员,一般由淋巴细胞、肿瘤细胞或其基质细胞分泌,在炎症、感染、恶性肿瘤中发挥免疫监视作
脂质代谢改变是恶性肿瘤进展的重要特征,FAS是脂肪酸合成的关键酶,普遍表达于各种组织细胞中,为细胞生长提供能量。近年来研究发现在肿瘤细胞中FAS表达远高于癌旁正常细
SREBP-1c又称为脂肪细胞定向分化因子,是参与脂肪酸、甘油、胆固醇合成的重要基因核转录因子,在肿瘤生长中具有重要意义。既往研究发现,SREBP-1c表达越高,肿瘤恶性程度越高,在结直肠癌组织中的表达显著高于癌旁组
综上所述,血清CCL20、FAS、SREBP-1c可能与结直肠癌的发生发展有一定关联,可作为结直肠癌的辅助诊断筛查和预后随访指标,血清CCL20、FAS、SREBP-1c高水平可能预示着肿瘤进展和预后不良。随着技术的进步,相信在不久的将来CCL20、FAS、SREBP-1c有望作为新的诊断筛查手段,研究CCL20、FAS、SREBP-1c为靶点的药物也有望成为治疗结直肠癌、延缓肿瘤复发转移进展的新方案。
参考文献
DEKKER E, TANIS PJ, VLEUGELS JLA, et al. Colorectal cancer[J]. Lancet, 2019, 394(10207): 1467-1480. [百度学术]
李志祥, 谢强, 王彬彬, 等. 长链非编码RNA AC005062.1通过调控结肠癌转移相关基因1的表达对结直肠癌恶性表型的影响[J]. 安徽医科大学学报, 2022, 57(5): 736-741. [百度学术]
GU MJ, HUANG QC, BAO CZ, et al. Attributable causes of colorectal cancer in China[J]. BMC Cancer, 2018, 18(1): 38. [百度学术]
CABRERO-DE LAS HERAS S, MARTÍNEZ-BALIBREA E. CXC family of chemokines as prognostic or predictive biomarkers and possible drug targets in colorectal cancer[J]. World J Gastroenterol, 2018, 24(42): 4738-4749. [百度学术]
EMMANOUIL G, AYIOMAMITIS G, ZIZI-SERMPETZOGLOU A, et al. Angiodrastic chemokines in colorectal cancer: clinicopathological correlations[J]. Anal Cell Pathol, 2018, 2018: 1616973. [百度学术]
AGUIRRE-PORTOLÉS C, FERNÁNDEZ LP, RAMÍREZ DE MOLINA A. Precision nutrition for targeting lipid metabolism in colorectal cancer[J]. Nutrients, 2017, 9(10): 1076. [百度学术]
PAKIET A, KOBIELA J, STEPNOWSKI P, et al. Changes in lipids composition and metabolism in colorectal cancer: a review[J]. Lipids Health Dis, 2019, 18(1): 29. [百度学术]
YU XH, YUAN ZX, YANG ZL, et al. The novel long noncoding RNA U50535 promotes colorectal cancer growth and metastasis by regulating CCL20[J]. Cell Death Dis, 2018, 9(7): 751. [百度学术]
JAFARI N, DRURY J, MORRIS AJ, et al. De novo fatty acid synthesis-driven sphingolipid metabolism promotes metastatic potential of colorectal cancer[J]. Mol Cancer Res, 2019, 17(1): 140-152. [百度学术]
岳朝驰, 杨向东. SREBP-1在结直肠癌组织中的表达及其临床意义[J]. 中国老年学杂志, 2017, 37(23): 5851-5853. [百度学术]
中国结直肠癌诊疗规范(年版)专家组. 国家卫生健康委员会中国结直肠癌诊疗规范(2020年版)[J]. 中华胃肠外科杂志, 2020, 23(6): 521-540. [百度学术]
FARAH ABDIDAHIR MOHAMUD(法拉). FAS及SREBP: 1c在结直肠癌组织与血清中的表达及其与临床分期的关系[D]. 扬州: 扬州大学, 2019. [百度学术]
WUNDERLICH CM, ACKERMANN PJ, OSTERMANN AL, et al. Obesity exacerbates colitis-associated cancer via IL-6-regulated macrophage polarisation and CCL-20/CCR-6-mediated lymphocyte recruitment[J]. Nat Commun, 2018, 9(1): 1646. [百度学术]
WANG D, YANG L, YU WN, et al. Colorectal cancer cell-derived CCL20 recruits regulatory T cells to promote chemoresistance via FOXO1/CEBPB/NF-κB signaling[J]. J Immunother Cancer, 2019, 7(1): 215. [百度学术]
张解放, 薛洪峰, 王茂峰, 等. 趋化因子CCL2在结直肠癌组织中的表达及其作用机制[J]. 中华普通外科杂志, 2018, 33(7): 589-591. [百度学术]
WANG D, YUAN WT, WANG YP, et al. Serum CCL20 combined with IL-17A as early diagnostic and prognostic biomarkers for human colorectal cancer[J]. J Transl Med, 2019, 17(1): 253. [百度学术]
陈志京, 廖山婴, 吴伍林, 等. 趋化因子CCL20、SDF-1在大肠癌中的表达及其与淋巴结及肝脏转移的关系[J]. 广东医学, 2018, 39(17): 2598-2601, 2605. [百度学术]
程先硕, 杨芳, 董坚, 等. CCL20通过AKT/MMP3轴而非EMT途径诱导结肠癌SW480细胞的侵袭和转移[J]. 中国肿瘤生物治疗杂志, 2019, 26(6): 650-655. [百度学术]
KADOMOTO S, IZUMI K, MIZOKAMI A. The CCL20-CCR6 axis in cancer progression[J]. Int J Mol Sci, 2020, 21(15): 5186. [百度学术]
黄娟, 邹小芹, 佘莎, 等. 脂肪酸合成酶与信号传导及转录激活因子3相互作用促进肝癌细胞的迁移和侵袭[J]. 中华肝脏病杂志, 2019, 27(9): 681-686. [百度学术]
白雨微, 黄小齐, 刘航, 等. 微小RNA-433-3p靶向调控RAP1A对结直肠癌细胞生物学行为的影响[J]. 临床肿瘤学杂志, 2022, 27(12): 1092-1098. [百度学术]
MOHAMED AH, SAID NM. Immunohistochemical expression of fatty acid synthase and vascular endothelial growth factor in primary colorectal cancer: a clinicopathological study[J]. J Gastrointest Cancer, 2019, 50(3): 485-492. [百度学术]
ZAYTSEVA YY, RYCHAHOU PG, LE AT, et al. Preclinical evaluation of novel fatty acid synthase inhibitors in primary colorectal cancer cells and a patient-derived xenograft model of colorectal cancer[J]. Oncotarget, 2018, 9(37): 24787-24800. [百度学术]
GAO YY, NAN XX, SHI XJ, et al. SREBP1 promotes the invasion of colorectal cancer accompanied upregulation of MMP7 expression and NF-κB pathway activation[J]. BMC Cancer, 2019, 19(1): 685. [百度学术]
WEN YA, XIONG XP, ZAYTSEVA YY, et al. Downregulation of SREBP inhibits tumor growth and initiation by altering cellular metabolism in colon cancer[J]. Cell Death Dis, 2018, 9(3): 265. [百度学术]