摘要:目的建立RP-HPLC-ΜV法测量人血浆及血小板中5-HT的含量及进行方法学验证。色谱条件采用Waters C18反相色谱柱(200mm×4.6mm,5μm),预柱plμs-C18(12.5mm×4.6mm),流动相为0.05mol/L磷酸二氢钾-甲醇(体积比为25:2)溶液,流速为0.8mL/min,紫外检测器,检测波长为275nm。结果 5-羟色胺与内标在11min内完全分离,定量下限为0.025μg.L-1,在0.025μg.mL-1-6.40μg.mL-1时线性关系良好,r=0.9998。经测定血浆中低、中、高浓度下的回收率分别为95.6%,95.7%,101.1%。血小板中回收率为99.1%、103.4%、104.2%。日内精密度高中低RSD=5.1%、3.1%和5.8%,日间为6.4%、7.8%和9.2%,均符合方法学要求。结论该法高效、简便、灵敏、稳定、重现性好,可用于5羟色胺的血药浓度的测定和生物等效性研究。
