摘要:目的制备携带P16a基因的聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒并在喉癌细胞中进行表达。方法选用乳化聚合法制备PBCA-NPs,以激光粒度分析仪及透射电子显微镜分析纳米粒的形态和粒径。用阳离子表面活性剂十六烷基三乙基溴化铵(CTAB)对纳米粒进行表面修饰。构建真核表达载体pIRES2-EGFP-P16a经过酶切鉴定及测序后与PBCA-NPs连接,转染喉癌细胞Hep-2,荧光显微镜检测转染效率,蛋白印迹法检验P16a基因的表达,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果所制PBCA-NPs粒径均匀、Zeta电位较高,较为理想;重组质粒pIRES2-EGFP-P16a经过酶切鉴定及测序后,表明真核表达载体构建正确;PBCA-NPs可以介导pIRES2-EGFP-P16a高效转染喉癌细胞,蛋白印迹检测表明转染后喉癌细胞能够表达外源P16a基因,在其介导下P16a能有效抑制喉癌细胞的增殖并能诱导细胞凋亡。结论聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒可以作为一种良好的基因载体,为喉癌的基因治疗提供了新思路。
