摘要:目的观察超声生物技术对异种松质骨的脱细胞作用,制备脱细胞异种松质骨材料,并检测其性能。方法取成年猪股骨下端松质骨,切取成10mm×10mm×6mm大小的松质骨块,蒸馏水反复冲洗去除松质骨内血液,加入1∶1氯仿/甲醇液室温下震荡脱脂和超声处理,超声波参数设定为:频率20KHz、功率200w、工作5s、间隔5s、工作60次,去除骨髓中的脂肪组织和基质中的脂蛋白成分,然后用含0.5%Dispase酶和1%Triton-X100的0.05mol/LTris-HCL缓冲液联合作用(pH7.8),室温下震荡消化和超声处理,超声参数设定为:频率40KHz、功率100w、时间10min,制备脱细胞松质骨块,对材料进行组织学检测、扫描电镜观察、力学强度测定。结果所制备的松质骨材料外观呈白色蜂窝状多孔结构,镜下观察到网状骨小梁结构完整、无破坏,骨板间胶原纤维排列整齐,与骨小梁的纵轴平行排列,骨髓腔中血细胞、脂肪细胞去除彻底,亦未见基质细胞残留,椭圆形骨陷窝空虚,未见骨细胞核及其它结构。扫描电子显微镜观察,材料保留原松质骨的网状孔隙系统,呈三维多孔结构,孔径为(327.6±31.1)μm,空隙相互连通,孔隙率为(63.5±4.9)%,具有骨组织工程支架材料结构特征,材料的抗压强度为9.74Mpa,接近于新鲜松质骨的抗压强度(12.13Mpa)。结论应用超声生物技术可快速、有效去除异种松质骨中的细胞成分,较好保留异种松质骨的显微结构与力学强度。
