摘要:目的观察siRNA-Smad3对TGF-β1诱导的肌成纤维细胞(C2C12)分泌Ⅰ型胶原的影响。方法用不同浓度的TGF-β1(0、1、5和10ng/mL)干预C2C12细胞24h,200pmol/L siRNA-smad3转染C2C12细胞24h,用ELISA和RT-PCR方法测定Ⅰ型胶原蛋白和mRNA表达。结果0、1、5和10ng/mL TGF-β1干预C2C12细胞,Ⅰ型胶原蛋白(ng/mL)检测结果分别为(616±16),(713±19),(783±23),(853±17),Ⅰ型胶原mRNA表达(Ⅰ型胶原/β-actin光密度比值)分别为(0.93±0.08),(1.83±0.17),(2.50±0.29),(2.94±0.14),三组间相互比较P均<0.01。200pmol/L siRNA-Smad3转染C2C12细胞24h后,用5ng/mL TGF-β1分别干预24h后检测Ⅰ型胶原蛋白:实验组、空白对照组、内对照组分别为(413±20)、(473±29)、(571±29)ng/mL;Ⅰ型胶原mRNA表达分别为(0.78±0.17)、(0.86±0.10)、(1.85±0.19)。内对照组表达增强(与实验组比较P<0.05)。结论TGF-β1促进C2C12细胞Ⅰ型胶原合成与mRNA表达呈剂量依赖性;siRNA阻断Smad3表达,抑制了TGF-β1促进Ⅰ型胶原合成与mRNA表达的作用。
