摘要:目的获得前列腺特异性膜抗原(PSMA)基因,应用巢式反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测前列腺癌(PC)患者外周血中PSMAmRNA。方法从人前列腺癌细胞系LNCaP中提取总RNA,经RT-PCR扩增PSMA基因,克隆入pUC19质粒中,用全自动荧光测序仪测定其序列。根据PSMAcDNA序列设计合成引物,应用巢式RT-PCR方法检测36例PC患者和23例前列腺增生(BPH)患者外周血中PSMAmRNA,结果与巢式RT-PCR方法检测前列腺特异抗原(PSA)mRNA比较。结果获得了PSMA基因(由2253bp组成,可编码751个氨基酸),与已发表的PSMAcDNA序列一致。应用巢式RT-PCR方法检测PC患者外周血PSMAmRNA灵敏度和特异度分别为66.7%和100.0%,与巢式RT-PCR方法检测PC患者外周血PSAmRNA(灵敏度和特异度分别为30.6%和87.0%)比较差异显著。结论成功地克隆了PSMA基因并应用于临床PC诊断,巢式RT-PCR方法检测患者外周血中PSMAmRNA在PC诊断中的真实性和可靠性明显优于PSAmRNA。
